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您的位置:首頁 > 產品中心 > 細胞分類 > 細胞系 > PT-K75細胞PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞

產品中心
產品名稱:

PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞

產品型號: PT-K75細胞
產品時間: 2024-11-22
描述:PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞特性
1) 來源:豬鼻
2) 形態(tài):成纖維細胞樣,貼壁生長
3) 含量:1x10^6 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
6) 準備DMEM培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;雙抗,1%
7) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%

產品介紹

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和服務介紹:

       一、原代細胞服務:

              各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源

              多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源

              原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
              原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務

       二、細胞系服務:
              細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書
              細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
              細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等

       三、iPS細胞服務:
              iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
              iPS細胞增殖及冷凍保存
              iPS基礎培養(yǎng)技術實習
              新藥及實驗儀器上市前評估

       四、其他技術外包服務、客戶定制服務等

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司

PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞特性

1) 來源:豬鼻

2) 形態(tài):成纖維細胞樣,貼壁生長

3) 含量:>1x106 個/mL

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式

(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟

(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現污染,請及時拍照與我們聯系。


細胞用途:僅供科研使用。

PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞接受后的處理:

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基。

4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。

5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。


細胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注:di一次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。

下面T25瓶為類;

1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1mlyi酶,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。

2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。

3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取

序號

產品名稱

貨號

規(guī)格

售價

備注

1

培養(yǎng)基1640

icell-0002

500ml

140

2

培養(yǎng)基DMEM

icell-0001

500ml

140

3

培養(yǎng)基DMEM/F12

icell-0005

500ml

140

4

內皮細胞培養(yǎng)基ECMsciencel

icell-0016

500ml

2280

5

動物上皮細胞培養(yǎng)基Epicm-a

icell-0015

500ml

1980

6

上皮細胞培養(yǎng)基Epicm

icell-0017

500ml

1980

7

Mccoy’s 5A 培養(yǎng)基

icell-0011

500ml

160

8

MEM培養(yǎng)基

icell-0012

500ml

140

9

FBS北美胎牛血清

GIBCO   16000-044

500ml

6800

10

FBS墨西哥胎牛血清

10437-028

500ml

5616

11

馬血清

gibco.16050122

500ml

1489

12

DMSO

sigma-D2650

100ml

1520

13

PBS片劑(1000ml)

09-9400-100

100片

4170

14

PS雙抗(進口)

15140-122

100ml

452

15

yi蛋白酶

25200-072

500ml

665



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