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產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
NCI-H1395 人肺腺癌細(xì)胞/STR鑒定介紹
這株細(xì)胞是1986年4月建株的。患者吸煙,每年15包。 ATCC CRL-5957是一株來源于同一患者的類淋巴母細(xì)胞。
細(xì)胞特性
1) 來源:肺腺癌
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式
(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;
(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細(xì)胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
NCI-H1395 人肺腺癌細(xì)胞/STR鑒定接受后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代。
5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。
下面T25瓶為例;
1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務(wù)介紹:
一、原代細(xì)胞服務(wù):
各類模式哺乳動物的多種原代細(xì)胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細(xì)胞資源
原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
原代細(xì)胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)及整體實驗外包服務(wù)
二、細(xì)胞系服務(wù):
細(xì)胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說明書
細(xì)胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo)
細(xì)胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長因子、試劑等
三、iPS細(xì)胞服務(wù):
iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細(xì)胞增殖及冷凍保存
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習(xí)
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術(shù)外包服務(wù)、客戶定制服務(wù)等
鏡像綺點(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司
序號 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 售價 | 備注 |
1 | 培養(yǎng)基1640 | icell-0002 | 500ml | 140 |
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2 | 培養(yǎng)基DMEM | icell-0001 | 500ml | 140 |
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3 | 培養(yǎng)基DMEM/F12 | icell-0005 | 500ml | 140 |
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4 | 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基ECMsciencel | icell-0016 | 500ml | 2280 |
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5 | 動物上皮細(xì)胞培養(yǎng)基Epicm-a | icell-0015 | 500ml | 1980 |
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6 | 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基Epicm | icell-0017 | 500ml | 1980 |
|
7 | Mccoy’s 5A 培養(yǎng)基 | icell-0011 | 500ml | 160 |
|
8 | MEM培養(yǎng)基 | icell-0012 | 500ml | 140 |
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9 | FBS北美胎牛血清 | GIBCO 16000-044 | 500ml | 6800 |
|
10 | FBS墨西哥胎牛血清 | 10437-028 | 500ml | 5616 |
|
11 | 馬血清 | gibco.16050122 | 500ml | 1489 |
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12 | DMSO | sigma-D2650 | 100ml | 1520 |
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13 | PBS片劑(1000ml) | 09-9400-100 | 100片 | 4170 |
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14 | PS雙抗(進(jìn)口) | 15140-122 | 100ml | 452 |
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15 | 胰蛋白酶 | 25200-072 | 500ml | 665 |
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